小鼠松弛肽(RLN)ELISA試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

磷酸化蛋白激酶B抗體

銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體

酰基輔酶A合成酶家族4抗體

酸性磷酸酶樣蛋白2抗體

AHNAK核蛋白2抗體

二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體

p53誘導(dǎo)蛋白5抗體

錨蛋白重復(fù)域5抗體

腦鈉通道蛋白2抗體

腦鈉通道蛋白4抗體

小腸鈉通道蛋白5抗體

APXL蛋白抗體

酸敏感離子通道蛋白3抗體

天門冬氨酸β羥化酶抗體

精氨酸加壓素受體2抗體

細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白樣蛋白3抗體

膜粘連蛋白8抗體

水通道蛋白8抗體

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體

凋亡抑制因子5抗體

水通道蛋白-3抗體

載脂蛋白D抗體

丁?；o酶A合成酶3抗體

脂肪細(xì)胞源性亮氨酸氨基肽酶抗體（血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白）

線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體