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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠胚胎肝母細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

小鼠胚胎肝母細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MOGAT3蛋白抗體 鋅指蛋白471抗體 乙?;疶RIM29蛋白抗體 小鼠臍靜脈平滑肌細(xì)胞 大鼠前列腺成纖維細(xì)胞 PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化 HUVEC+GFP人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化+GFP

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:114

更新時間:2024-11-04

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠胚胎肝母細(xì)胞

小鼠胚胎肝母細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

胚胎;肝臟

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X7651

細(xì)胞簡介:

小鼠胚胎肝母分離自胚胎肝組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟起源于腹側(cè)前腸內(nèi)胚層細(xì)胞(一種多潛能干細(xì)胞)。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠,前腸的原始上皮細(xì)胞接觸心肌中胚層后快速增殖,形成肝原基。大約1d后,原始上皮細(xì)胞侵入原始橫膈,繼續(xù)分化為幼稚肝臟上皮細(xì)胞,這些細(xì)胞先表達(dá) AFP 然后是ALb。幼稚肝臟上皮細(xì)胞很快成熟,并進(jìn)一步分化為肝細(xì)胞或膽管上皮細(xì)胞,因?yàn)榇似诘母闻K上皮細(xì)胞其具有向這兩種肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞雙向分化的潛能,所以又稱肝母細(xì)胞。

方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎肝母采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎肝母經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠胚胎肝母細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠胚胎肝母細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

血管活性腸肽 (VIP)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

內(nèi)脂素 / 內(nèi)臟脂肪素 (Visfatin)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

軟骨糖蛋白 39(YKL-40)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(mouse ACE)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠乙型肝表面抗體(HBsAb)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cluster of differeiation 28 (sCD28) ELISA Kit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原28(sCD28)試劑盒

Humanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit 人谷脫羧酶(GAD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor6-keto-PGF1a(Rabbit6-keto-prostaglandinF1a)ELISAKit6同前列腺素F1a

飲料L-蘋果酸比色法定量試劑盒20

Mousemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/H-2ELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHC/H-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T

HRAS樣抑制因子3抗體

DPY19L2蛋白抗體

BTLA重組小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

防御素β131(DEFβ131)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 131 (DEFb131)

CD33重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

CD3D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白

防御素β131(DEFβ131)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 131 (DEFb131)

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

BTLA重組小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD3D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白

CD33重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠胚胎肝母細(xì)胞大鼠鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶激酶(CaMKK)試劑盒 ,英文名: CaMKK ELISA Kit

Porcine low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 豬低分子肝素(LMWH)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMCP-1/CCL2/MCAF(Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor)ELISAkit人單核細(xì)胞趨化蛋白1

體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性熒光定量試劑盒20

ELISAKitWGA麥胚凝集素/凝集蛋白

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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