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更新時間:2024-11-04
小鼠脈絡膜微血管內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
脈絡膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7549 |
細胞簡介:
小鼠脈絡膜微血管內皮分離自眼球脈絡膜組織;脈絡膜在視網膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細胞,對外力沖擊的耐受性較視網膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,圍繞視神經乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網膜之間,續(xù)連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用,對整個視覺神經有調節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細胞,有營養(yǎng)和遮光作用。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠脈絡膜微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠脈絡膜微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
粒細胞防御素 英文名稱: Neuophil Peptide-1 規(guī)格: 英文縮寫: HNP-1
免疫球蛋白IgM 英文名稱: immunoglobulin M 規(guī)格: 英文縮寫: IgM
白介素-1α 英文名稱: ierleukin-1α 規(guī)格: 英文縮寫: IL-1α
白介素-1β 英文名稱: ierleukin-1β 規(guī)格: 英文縮寫: IL-1β
豬雌二醇(E2)ELISA 試劑盒
Human macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 人巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒
PorcineOrexieceptor,OXRELISAKit 豬食欲素受體(OXR)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforALP-BELISAKit大鼠骨特異性堿性0酸酶B
血液0酸甲戊二羥酸激酶(phosphomevalonatekinase)活性比色法定量試劑盒20次
Mouseα2-plasmininhititor,α2-PIELISAKit小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)試劑盒
FA83D蛋白抗體
AF750標記的磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
SEMA4D重組大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 Protein
F1 operon positive regulatory protein(NT 0.5mgF1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽)
NRXN3重組人 Neurexin-3-beta / NRXN3 蛋白 Protein
ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白 (His & GST 標簽)
EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)
F1 operon positive regulatory protein(NT 0.5mgF1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽)
ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白 (His & GST 標簽)
SEMA4D重組大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 Protein
EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)
NRXN3重組人 Neurexin-3-beta / NRXN3 蛋白 Protein
小鼠脈絡膜微血管內皮細胞大鼠肝素結合性表皮生長因子(HBEGF)試劑盒 ,英文名: HBEGF ELISA Kit
Rat alpha 1 acid glycoprotein (1-AGP) ELISA Kit 大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒
RatActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAMELISAKit 大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforE3ELISAKit大鼠雌三醇
細胞培養(yǎng)上清氨熒光定量試劑盒20次
RatinhibitorysubunitofNF-κBα,IKBαELISAKit大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)試劑盒
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