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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

兔支氣管上皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

兔支氣管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:淋巴細(xì)胞抗原6H抗體 鋅指蛋白297B抗體 癌/睪丸抗原11.4抗體 兔子宮成纖維細(xì)胞 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 ME-180人表皮樣癌細(xì)胞 DU 145 (人前列腺癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問(wèn)量:131

更新時(shí)間:2024-11-04

產(chǎn)品特性Product characteristics

兔支氣管上皮細(xì)胞

兔支氣管上皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

支氣管

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X7991

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔支氣管上皮分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級(jí)分枝,由氣管分出的一級(jí)支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長(zhǎng),走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。支氣管上皮細(xì)胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機(jī)制中均起著重要的作用。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的兔支氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合機(jī)械刮刷并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的兔支氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

兔支氣管上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

兔支氣管上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔支氣管上皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

豬肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬生長(zhǎng)激素(GH)ELISA 試劑盒

Human kallikrein 10 (KLK 10) ELISA Kit 10(KLK 10)試劑盒

GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgGELISAKit 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforANG-1ELISAKit大鼠血管生成素1

血液氧化酶(DAO)活性熒光定量試劑盒20

Porcineendothelin1,ET-1ELISAKit豬內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒

eIF4A1蛋白抗體

雙特異性磷酸酶2抗體

HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原

JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白  Protein

B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白

SELE Protein Human 重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原

B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白

HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SELE Protein Human 重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白  Protein

兔支氣管上皮細(xì)胞大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-)試劑盒 ,英文名: Tn- ELISA Kit

Rabbit P53 (P53) ELISA Kit p53(p53)試劑盒

(BCV)核酸試劑盒(-PCR) 48T

CLIAKitforMousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體

體液鈣離子濃度熒光定量試劑盒20

ELISAKit6-OHDA6-羥多巴胺

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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