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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問(wèn)量:93
更新時(shí)間:2024-11-04
兔胃平滑肌細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
胃 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8047 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔胃平滑肌分離自胃組織;胃柔軟,活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞,充盈時(shí)變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構(gòu)成。粘膜上皮為柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構(gòu)成大量腺體(胃底腺、賁門腺、幽門腺),它們的分泌物混合形成胃液,對(duì)食物進(jìn)行化學(xué)性消化。粘膜在幽門處由于覆蓋幽門括約肌的表面而形成環(huán)狀的皺襞叫幽門瓣。胃肌膜由三層平滑肌構(gòu)成,外層縱形,中層環(huán)形,內(nèi)層斜行,其中環(huán)形肌,在幽門處特別增厚形成幽門括約肌。胃平滑肌細(xì)胞源自胃的平滑肌層,細(xì)胞通過(guò)緊密連接,進(jìn)行同步性運(yùn)動(dòng),完成肌肉的舒縮活動(dòng),以推動(dòng)食物前進(jìn),完成對(duì)食物的機(jī)械性消化,并促進(jìn)化學(xué)性消化和吸收。胃平滑肌具有肌組織的共同特性,如興奮、自律性、傳導(dǎo)性和收縮性,在離體后,置于適宜的環(huán)境內(nèi),仍能進(jìn)行良好的節(jié)律性運(yùn)動(dòng),但其收縮很緩慢,節(jié)律性遠(yuǎn)不如心肌規(guī)則。胃平滑肌對(duì)電刺激較不敏感,但對(duì)于牽張、溫度和化學(xué)刺激則特別敏感,輕微的刺激??梢饛?qiáng)烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環(huán)境分不開的,胃內(nèi)容物對(duì)平滑肌的牽張、溫度和化學(xué)刺激是引起內(nèi)容物推進(jìn)或排空的自然刺激因素。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胃平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胃平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔胃平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠FMS樣酪酸激酶試劑盒 小鼠FMS樣酪酸激酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠FMS樣酪酸激酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠FMS樣酪酸激酶試劑盒、小鼠FMS樣酪酸激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠FMS樣酪酸激酶3配體試劑盒 小鼠FMS樣酪酸激酶3配體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠FMS樣酪酸激酶3配體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠FMS樣酪酸激酶3配體試劑盒、小鼠FMS樣酪酸激酶3配體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠N-乙?;?span>-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸試劑盒 小鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠N-乙?;?span>-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠N-乙?;?span>-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸試劑盒、小鼠N-乙?;?span>-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠Slit2試劑盒 小鼠Slit2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠Slit2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠Slit2試劑盒、小鼠Slit2eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human growth factor (HGH) ELISA Kit 人生長(zhǎng)因子(HGH)試劑盒
HumanGlucagon,GCELISAKit 人胰高血糖素(GC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-Sa-aibody試劑盒人抗Sa抗體(ai-Sa-Ab)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞周期M期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
humanyptophanyl-NAsyhetase,WARSELISAKit人色氨酰NA合成酶(WARS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF750標(biāo)記的髓樣細(xì)胞白血病-1抗體
人紅細(xì)胞單克隆抗體
大鼠
Collagen I(Anti-Collagen Type I 0.5mgCollagen I(Anti-Collagen Type I) I型膠原蛋白
NRP1重組人 Neuropilin-1 / NRP1 / CD304 蛋白 Protein
FANCA Protein Human 重組人 FANCA / FACA 蛋白
IL13RA1 Protein Mouse 重組小鼠 IL13RA1 蛋白
Collagen I(Anti-Collagen Type I 0.5mgCollagen I(Anti-Collagen Type I) I型膠原蛋白
FANCA Protein Human 重組人 FANCA / FACA 蛋白
大鼠
IL13RA1 Protein Mouse 重組小鼠 IL13RA1 蛋白
NRP1重組人 Neuropilin-1 / NRP1 / CD304 蛋白 Protein
兔胃平滑肌細(xì)胞大鼠激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)試劑盒 ,英文名: TARC ELISA Kit
Mouse heat shock protein 27 (HSP-27) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒
MouseC-ReactiveProtein,CRPELISAKit 小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanai-thrombieceptor,AELISAKit人抗受體
細(xì)胞FAK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBigET大鼠大內(nèi)皮素
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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