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更新時(shí)間:2024-11-04
兔腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腎上腺 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8140 |
細(xì)胞簡介:
兔腎上腺皮質(zhì)分離自腎上腺組織;腎上腺是機(jī)體相當(dāng)重要的內(nèi)分泌器官,由于位于兩側(cè)腎臟的上方,故名腎上腺。腎上腺左右各一,位于腎的上方,共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形,右腎上腺為三角形。從側(cè)面觀察,腺體分腎上腺皮質(zhì)和腎上腺髓質(zhì)兩部分,周圍部分是皮質(zhì),內(nèi)部是髓質(zhì)。腎上腺內(nèi)部是髓質(zhì)部分,分泌腎上腺素和。這些激素在應(yīng)激狀態(tài)釋放增多,能夠幫助升高血壓,加快心率,升高血糖,動(dòng)員全身的儲備物質(zhì),為機(jī)體與外界環(huán)境的抗?fàn)幾骱贸浞譁?zhǔn)備。腎上腺外部是皮質(zhì)部分,分泌醛固酮、和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進(jìn)小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收,正常數(shù)量的醛固酮,對維持機(jī)體正常血壓有重要作用。但是如果過多分泌,會導(dǎo)致高血壓和低血鉀。是機(jī)體必需的激素之一。當(dāng)機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí),比如感冒,發(fā)燒,遇到突發(fā)事件的時(shí)候,腎上腺皮質(zhì)分泌大量的,這些能夠動(dòng)員機(jī)體的存儲能源,為應(yīng)對內(nèi)部或者外部重要事件提供充分的物質(zhì)準(zhǔn)備。當(dāng)缺乏時(shí),機(jī)體在遇到重大事件的時(shí)候,往往缺乏足夠應(yīng)對能力,容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產(chǎn)生的雄激素,對雄性來講,并非,但是對雌性而言,是雄激素的一個(gè)重要來源。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎上腺皮質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎上腺皮質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳1-3代左右;2代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔腎上腺皮質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子結(jié)合蛋白4試劑盒 兔子結(jié)合蛋白4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子結(jié)合蛋白4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子結(jié)合蛋白4試劑盒、兔子結(jié)合蛋白4eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子透明質(zhì)酸試劑盒 兔子透明質(zhì)酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子透明質(zhì)酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子透明質(zhì)酸試劑盒、兔子透明質(zhì)酸eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人血管緊張素原試劑盒 人血管緊張素原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人血管緊張素原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人血管緊張素原試劑盒、人血管緊張素原eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒
Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
1號染色體開放閱讀框135抗體
內(nèi)皮單核細(xì)胞激活肽2抗體
IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein
NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細(xì)胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)
TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein
GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白
S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白
NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細(xì)胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)
GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白
IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein
S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白
TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein
兔腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞大鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)試劑盒 ,英文名: MCP-1/CCL2 ELISA Kit
Mouse ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒
MousephosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽
同位素標(biāo)記放射活性離心柱試劑盒20次
ELISAKitpERK大鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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