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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號(hào):
廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量:112
更新時(shí)間:2024-11-04
兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
臍帶組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7148 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔臍靜脈內(nèi)皮分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類(lèi)的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu),臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤(pán)的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤(pán),臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤(pán)運(yùn)送給胎兒。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔臍靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔臍靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白 英文名稱(chēng): eosinophil cationic protein 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): ECP
表皮生長(zhǎng)因子 英文名稱(chēng): epidermal growth factor 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): EGF
表皮生長(zhǎng)因子受體 英文名稱(chēng): epidermal growth factor receptor 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): EGFR
表皮生長(zhǎng)因子受體 英文名稱(chēng): epidermal growth factor receptor 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): EGFR
豚鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human hepatitis E virus IgG (HEV-IgG) ELISA Kit 人戊型肝病毒IgG(HEV-IgG)試劑盒
Humanα-Endomorphin,α-EPELISAKit 人α-內(nèi)肽(α-EP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCP試劑盒人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織D-葡萄糖氧化法定量試劑盒20次
humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit人前列腺素E1(PGE1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
白介素-22抗體
磷脂酰肌醇激酶抗體
TCN2重組小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 蛋白 Protein
白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)
B3GNT2重組人 B3GNT2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)重組蛋白 Recombinant Telomerase Associated Protein 1 (TEP1)
IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白
S100B重組小鼠 S100B / S100beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IL17RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
DDR2重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein
兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠抗利尿激素(ADH)試劑盒 ,英文名: ADH ELISA Kit
Monkey heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)試劑盒
RatannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFSELISAKit大鼠卵泡抑素
細(xì)胞氧化酶活性熒光定量試劑盒20次
Ratplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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