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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：LIM同源框蛋白1抗體 棉鈴蟲紫外波長(zhǎng)敏感的視蛋白抗體 囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SFT2B抗體 兔胚胎成纖維細(xì)胞 人腦成纖維細(xì)胞 NCI-H460人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NIH:OVCAR-3 [OVCAR3] (人卵巢癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：100
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腦動(dòng)脈 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7866 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮分離自腦動(dòng)脈組織；腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行，所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈；各級(jí)靜脈都沒有瓣膜，它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能：①維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡；②合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)；③維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
十六烷基-二甲基-乙基- 50g
CetyldimethylethylAmmoniumBromide 100g
化十六烷基 100g
CetylpyridniumChloride,Monohydrate 500g
豚鼠心肽(ANP)試劑盒 ，英文名： ANP ELISA Kit
Human secretory immunoglobulin A (SIgA) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒
rabbitbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit 兔子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBCGF(HumanBcellgrowthprotein)ELISAKit人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子
凝結(jié)時(shí)間(FIB)Clauss法試劑盒20次
RabbitCompleme3,C3ELISAKit兔補(bǔ)體蛋白3(C3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
TATA結(jié)合蛋白（核內(nèi)參）單克隆抗體
磷酸化基底膜相關(guān)軟骨素蛋白多糖抗體
NTRK3重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)重組蛋白 Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 18 (SOX18)
GLT8D2重組人 GLT8D2 蛋白 Protein
IL10RB Protein Human 重組人 IL10Rb 蛋白
Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike protein fragment (RBD, aa 367-606, His 標(biāo)簽)
性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)重組蛋白 Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 18 (SOX18)
IL10RB Protein Human 重組人 IL10Rb 蛋白
NTRK3重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike protein fragment (RBD, aa 367-606, His 標(biāo)簽)
GLT8D2重組人 GLT8D2 蛋白 Protein
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠醌NADH脫氫酶1(NQO1)試劑盒 ，英文名： NQO1 ELISA Kit
Monkey collagenase I (Collagenase I) ELISA Kit膠原酶I(Collagenase I)試劑盒
Ratulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFT4ELISAKit大鼠游離甲狀腺素
細(xì)胞琥珀酸脫氫酶活性染色試劑盒50次
RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
