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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

路鄧葡萄球菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

產(chǎn)品簡介:

路鄧葡萄球菌PCR檢測試劑盒規(guī)格運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。

產(chǎn)品型號(hào):50T

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:601

更新時(shí)間:2024-09-07

產(chǎn)品特性Product characteristics

路鄧葡萄球菌PCR檢測試劑盒規(guī)格原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

產(chǎn)品名稱

 路鄧葡萄球菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

英文名稱

 Staphylococcus lugdunensisPCR

貨號(hào)

 YS31462-R

特異性強(qiáng)

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。

 

適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對(duì)照:有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對(duì)照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
(2)可疑:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測,如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

Tuberin antibody [Y320]原裝、分裝二己基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]

Tuberin antibody [Y320]原裝、分裝二己基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]

Tuberin antibody [Y320]原裝、分裝1-磺鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]

BTK antibody [Y440]原裝、分裝1-磺鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]

BTK antibody [Y440]原裝、分裝1-磺鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]

BTK antibody [Y440]原裝、分裝1-磺鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]

CCR9 antibody [E99]原裝、分裝1-戊磺鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]

CCR9 antibody [E99]原裝、分裝1-戊磺鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]

CCR9 antibody [E99]原裝、分裝1-戊磺鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]Nicotinic Acetylcholine Receptor beta/CHRNB1 antibody [EP2067Y]原裝、分裝土大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)

CYP2J2 antibody原裝、分裝透骨香(標(biāo)準(zhǔn)品)

MAGEA4 antibody原裝、分裝半枝蓮(標(biāo)準(zhǔn)品)

Synaptogyrin 2 antibody原裝、分裝石椒草(標(biāo)準(zhǔn)品)

CLPB antibody原裝、分裝薯莨(標(biāo)準(zhǔn)品)

PKC delta (phospho Y311) antibody [EPR2609Y]原裝、分裝蒺藜(標(biāo)準(zhǔn)品)

PKC delta (phospho Y311) antibody [EPR2609Y]原裝、分裝石吊蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)

PKC delta (phospho Y311) antibody [EPR2609Y]原裝、分裝隔山消(標(biāo)準(zhǔn)品)

HSF1 (phospho S320) antibody [EPR1712]原裝、分裝大果木姜子(標(biāo)準(zhǔn)品)
路鄧葡萄球菌PCR檢測試劑盒規(guī)格biglycan1,5-O-二咖啡??鼘?/span>

Dihydro testosterone黃芩素

Bisphenol-A洛伐他汀

Fibulin 1染料木苷

*肉豆蔻甘油三酯

Leptin Receptor麥冬皂苷A

Leptin槐定

receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2溴東莨菪

Forssman antibody衛(wèi)矛醇

eosinophil cationic protein原部次

 

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