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小鼠雜交瘤細(xì)胞;IE3A10C8E5培養(yǎng)步驟

日期:2022-05-26瀏覽:756次

小鼠雜交瘤細(xì)胞;IE3A10C8E5培養(yǎng)步驟:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

2、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法三:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

1)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。棄培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,進(jìn)行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入到凍存液中。

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白172抗體

絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ICK抗體

肽酰tRNA水解酶ICT1抗體

alpha干擾素誘導(dǎo)蛋白27抗體

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白81抗體

Gamma干擾素誘導(dǎo)蛋白16抗體

異檸檬酸脫氫酶3 beta亞基抗體

干擾素誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1抗體

異檸檬酸脫氫酶gamma亞基抗體

Bipped B樣蛋白抗體

艾杜糖-2-硫酸酯酶抗體

α-L-艾杜糖苷酶抗體

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白122抗體

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白140抗體

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白20抗體

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白43抗體

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白80抗體

CD101抗體


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