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日期:2020-12-03瀏覽:1208次
小鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)ELISA試劑盒操作流程:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
為了減小過失,是先稀釋再加樣。而針對這位客戶所遇到的疑問,我公司技術人員是這樣說明的:
1. 前者測的是稀釋和移液的過失,后者只需移液過失。
2. 一般都是稀釋一次,分兩孔吧。同濃度的分復孔。
3. 由于是從同一原液稀釋,一般不考慮稀釋過失(稀釋過失是存在的),都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是逐個稀釋,這樣可以使稀釋過失減小)。
4. 復孔是為了掃除移液體積,板的影響,以及其他系統(tǒng)過失的,要求復孔的濃度是一起的。稀釋后分孔能滿意此要求,逐個稀釋不能。