国产传媒在线一区二区三区-大肉大捧一进一出好爽作文-国产精品视频亚洲精品-在线中文字幕无码视频

歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站

返回首頁|聯(lián)系我們

全國統(tǒng)一服務(wù)熱線:

15201736385
技術(shù)文章您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 霍亂弧菌CTX基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)反應(yīng)五要素

霍亂弧菌CTX基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)反應(yīng)五要素

日期:2020-10-27瀏覽:985次

霍亂弧菌CTX基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)反應(yīng)五要素

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

上一篇:新孢子蟲(Ne)核酸檢測試劑反應(yīng)五要素

下一篇:哈達(dá)爾沙門氏菌PCR檢測試劑盒TaqMan探針法

在線客服 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

021-59989018

掃一掃,關(guān)注我們

人妻系列无码专区久久五月天| 东京热日韩精品免费视频| 亚洲一级黄色片在线观看| 东方AⅤ一级黄片在线| 高清少妇熟女一区二区三区| 亚洲激情大色堂插进来综合网| 欧美日韩精品在线视频| 亚洲午夜在线有码福利| 久久精品人人做人人爽欧美| 日韩精品一区二区天堂| 亚洲午夜日韩在线观看| 中文字幕不卡一区在线| 日韩精品一区伦理视频| 日本特黄大片中文字幕| 午夜搞b视频在线免费观看| 午夜影院在线免费观看三区| 精品人妻一区二区三区四区五区久久 | 亚洲综合人人妻人人澡| 精品国产aⅴ一区二区三区| 中文字幕漂亮人妻在线| 国产欧美一区二区日韩| 中文字幕av在线不卡| 久久久久亚洲av成人网热| 91精品国产91久久久久蜜臀| 欧美日韩另类一区二区| 国产精品日韩一区视频| 国产精品综合色国产亚洲欧| 日本成人在线不卡视频| 亚洲不卡一区三区三州医院| 美女一二三四区免费观看| 亚洲精品一区二区99| 国产精品久久综合激情| 日本视频一区二区a动漫v| 亚洲精品中文字幕中文字幕| 91文字幕巨乱亚洲香蕉| 女人和男人三级黄片子| 九九99久久精品在免费线97| 91久久精品一区二区潘甜甜| 日韩高清在线一区不卡| 国产又粗又长又黄视频在线观看 | 日本一区不卡二区不卡|